1、問(wèn):STZ粉末收到后,如何保存?
答:多次稱(chēng)取要嚴(yán)格按照避免受潮的原則操作和存放。操作方法:操作環(huán)境、盛裝容器、分裝工具都必須保證干燥。分裝后用封口膜密封瓶口,用鋁箔紙或錫箔將瓶子包好,放入干燥罐里(干燥劑,即保持干燥狀態(tài)),并-20℃冷藏,可長(zhǎng)期保存。
2、問(wèn):STZ溶解可否使用其他緩沖液?
答:醋酸等溶液也可以做出,但其pH值不好控制,而STZ只有在pH4.2-4.5的時(shí)候才具有最佳藥力活性。推薦使用檸檬酸。
3、問(wèn):STZ注射液配制時(shí),粉末分裝需遵循什么原則?
答:STZ不穩(wěn)定,易失活,快速稱(chēng)取后剩余試劑仍要求干燥避光,推薦用干燥鋁箔或錫箔紙包裹。注射時(shí)若操作不熟練,切忌不可一次性溶解完STZ。建議根據(jù)操作熟練度,分組溶解STZ,比如10只或15只鼠/組。亦可提前將STZ按動(dòng)物分組的所需量稱(chēng)重,分裝。
4、問(wèn):建模時(shí),常用STZ劑量?
答:以200克鼠均重為例,Ⅰ型糖尿病模型:大鼠劑量為70~65 mg;Ⅱ型糖尿病模型:高糖高脂喂養(yǎng)1-2個(gè)月的大鼠,STZ劑量在25~40 mg;本劑量?jī)H做參考。建議通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)摸索最佳劑量,或參考文獻(xiàn)。
5、問(wèn):預(yù)實(shí)驗(yàn)非常重要嗎?
答:很重要。實(shí)驗(yàn)時(shí)STZ的給藥量應(yīng)參照預(yù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,盡量不要盲目按照文獻(xiàn)上或他人的給藥量來(lái)直接使用,鼠均重和空腹(低糖狀態(tài))抗藥力、禁食時(shí)長(zhǎng)、注射選時(shí)、以及之前飼養(yǎng)過(guò)程、測(cè)糖選時(shí)等都不相同,通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)來(lái)確定符合自己實(shí)驗(yàn)鼠的給藥計(jì)量,才是最科學(xué)的。
6、問(wèn):建模前,大鼠為何要禁食?
答:禁食12小時(shí)以上(一般過(guò)夜禁食,不禁水)。禁食的時(shí)間越長(zhǎng),STZ對(duì)胰島β細(xì)胞的破壞力越明顯,即藥效越高。所以相對(duì)禁食時(shí)間延長(zhǎng),可以降低STZ的用量。
7、問(wèn):注射方式對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響?
答:尾部注射即靜脈注射,藥物利用率較高,同比腹腔注射,可以節(jié)省藥量,缺點(diǎn)是操作起來(lái)不如腹腔注射方便。
8、問(wèn):注射時(shí),推進(jìn)速度和血糖的關(guān)系?
答:推注的速度快,更容易形成高血糖,推注的速度慢,相對(duì)的危險(xiǎn)性較低,但也不容易成模,常規(guī)操作中多要求快速注射。STZ的劑量是決定血糖高低的主要因素。
9、問(wèn):注射STZ后,模型不成功,如何處理?
答:模型不達(dá)標(biāo)者,三天后補(bǔ)注STZ(以10-20 mg體重劑量腹腔注射),也很容易成模,或讓血糖恢復(fù)正常后再常規(guī)劑量注射;但要達(dá)到理想的效果,往往需要恢復(fù)到正常狀態(tài)下重新造模。